抗體的概念和分類(lèi)
作者:陳青(北京維德維康生物技術(shù)有限公司)
所有免疫學(xué)測(cè)定的方法中,均要求有抗體參與,沒(méi)有抗體參與的生物學(xué)測(cè)定方法就不能叫免疫測(cè)定法。在elisa中,抗體的優(yōu)劣直接影響測(cè)定的質(zhì)量(如特異性、靈敏度、精密度和準(zhǔn)確性等)和操作簡(jiǎn)便性。因此,了解抗體的基本特性,制備抗體是建立和發(fā)展elisa理想方法的基本條件。
1.抗體概念:
抗體:動(dòng)物機(jī)體某些活性細(xì)胞在某些物質(zhì)(抗原)刺激下產(chǎn)生的,并能與這些物質(zhì)特異性結(jié)合的一類(lèi)活性物質(zhì)。
由于哺乳動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的抗體主要分布于體液,尤其是血清中,因此人們常常將抗血清作為抗體的同義詞,將抗原抗體反應(yīng)稱(chēng)為血清學(xué)反應(yīng)。實(shí)際上抗血清表示從免疫動(dòng)物體液或免疫細(xì)胞培養(yǎng)液中分離得到的原血清或培養(yǎng)液上清液,抗體則表示抗血清中能與抗原特異性結(jié)合的物質(zhì)。
抗體的種類(lèi)繁多,分類(lèi)也無(wú)一定標(biāo)準(zhǔn)。在免疫學(xué)專(zhuān)著中,常根據(jù)其產(chǎn)生機(jī)制、抗原來(lái)源、抗原刺激的方式以及與抗原反應(yīng)的性質(zhì)等特征進(jìn)行如下分類(lèi):
在elisa中,為了制備抗體,必須進(jìn)行人工免疫,并要求用作免疫的抗原(免疫原)來(lái)源與免疫動(dòng)物在分類(lèi)學(xué)上不屬于同一種,這樣制備的抗體稱(chēng)為異種抗體。但在自然界中常常發(fā)現(xiàn)同種動(dòng)物不同的個(gè)體之間,其組織成分的結(jié)構(gòu)也有差異,用這些組織成分刺激同種屬的另一個(gè)體,也能產(chǎn)生抗體,即同種抗體。某些抗體除與相應(yīng)抗原發(fā)生結(jié)合反應(yīng)外,還可與無(wú)血緣關(guān)系的抗原反應(yīng)。如以豚鼠組織免疫家兔,制得的抗體在補(bǔ)體參與下能溶解綿羊紅細(xì)胞,這一類(lèi)抗體稱(chēng)為異嗜抗體。此外還有一類(lèi)抗體稱(chēng)為自身抗體,是由于機(jī)體在某種條件下對(duì)自身組織(抗原物質(zhì))產(chǎn)生的抗體。這類(lèi)抗體在elisa中不僅不可能應(yīng)用,而且有干擾作用。根據(jù)抗原刺激的方式認(rèn)為,凡經(jīng)人工免疫、預(yù)防接種、感染或自然接觸某些抗原物質(zhì)所產(chǎn)生的抗體,都稱(chēng)為免疫抗體。反之,沒(méi)有明顯的抗原刺激即天然存在于體液中的抗體稱(chēng)為天然抗體。如血型系統(tǒng)中的抗A抗體和抗B抗體等,天然抗體不能用于elisa,相反對(duì)elisa測(cè)定的質(zhì)量有影響。
所謂*抗體就是通常所指的由抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體,其免疫球蛋白的單體有兩個(gè)以上的抗原結(jié)合點(diǎn),因此又稱(chēng)二價(jià)抗體或多價(jià)抗體。這類(lèi)抗體與抗原結(jié)合后可在特定條件下出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。如在普通生理鹽水中*抗體可與可溶性抗原(如蛋白質(zhì)膠體)或顆粒性抗原(如微生物顆粒)反應(yīng),出現(xiàn)可見(jiàn)的沉淀或凝集現(xiàn)象。
不*抗體又稱(chēng)為單價(jià)抗體或封閉抗體,由于免疫球蛋白單體中兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)之一失去免疫活性,即只有一個(gè)位點(diǎn)可與抗原結(jié)合。這類(lèi)抗體與抗原結(jié)合后,在生理鹽水中不能形成大的抗原抗體復(fù)合物,故不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng),但能封閉和遮掩抗原決定簇,阻遏抗原再與相應(yīng)的抗體結(jié)合。
抗原刺激動(dòng)物機(jī)體后,由多個(gè)免疫細(xì)胞系(克?。┊a(chǎn)生的抗體,可與同一抗原的多個(gè)決定簇結(jié)合,這類(lèi)抗體稱(chēng)為多克隆抗體。通常由免疫動(dòng)物制備的抗血清屬于這一類(lèi)。在特定條件下,通過(guò)克隆選擇(即除掉多余的免疫細(xì)胞系),由一個(gè)細(xì)胞系產(chǎn)生只能識(shí)別抗原某一類(lèi)決定簇的抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。
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